離心技術(shù)主要用于分離和制備各種生物樣品,將生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下置于貝克曼離心管中,由于巨大的離心力,懸浮的微小顆粒以一定的速度沉降,從溶液中分離出來(lái),離心管是離心測(cè)試中必需的實(shí)驗(yàn)耗材之一。
離心技術(shù)主要用于分離和制備各種生物樣品,將生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下置于離心管中,由于巨大的離心力,懸浮的微小顆粒以一定的速度沉降,從溶液中分離出來(lái),離心管是離心測(cè)試中必需的實(shí)驗(yàn)耗材之一。
離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或半透明,硬度小,可通過(guò)穿刺法取出梯度,缺點(diǎn)是容易變形,耐有機(jī)溶劑性差和使用壽命短。塑料離心管有蓋,它的功能是防止樣品泄漏,特別是當(dāng)用于放射性或高腐蝕性樣品時(shí),防止樣品泄漏非常重要,管帽還具有防止樣品揮發(fā)和支撐離心管的功能,以防止離心管變形。
選擇這一點(diǎn)時(shí),要注意檢查試管蓋是否緊緊,在試驗(yàn)過(guò)程中是否可以將其緊緊關(guān)閉,以至于上下顛倒不漏水。在塑料離心管中,常用的材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中,聚丙烯PP管的性能會(huì)比較好,因此,選擇塑料離心管時(shí)應(yīng)盡量考慮聚丙烯塑料離心管。
使用beckman超速離心管時(shí),離心力不應(yīng)太大,需要橡膠墊以防止管破裂。高速離心機(jī)通常不使用玻璃離心管。離心管的蓋子沒有很好地密封,液體不能裝滿,以防止溢出和失去平衡。溢出的后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔并影響傳感器的正常運(yùn)行,在超速離心過(guò)程中,必須用離心管填充液體,因?yàn)槌蛛x需要很高的真空度,只有通過(guò)填充才能防止離心管變形。
鋼制離心管堅(jiān)固,不會(huì)變形,可以抵抗熱,凍結(jié)和化學(xué)腐蝕,它的應(yīng)用范圍也很廣,但也應(yīng)避免與強(qiáng)腐蝕性化學(xué)品接觸,盡量避免這些化學(xué)物質(zhì)的腐蝕。
選擇合適的超濾離心管主要考慮MWCO和濃度體積,通常,截留分子量不應(yīng)大于目標(biāo)蛋白質(zhì)分子量的1/3。新購(gòu)買的超濾離心管是干燥的,使用前添加MilliQ水,水*通過(guò)膜,將其在冰浴或冰箱中預(yù)冷卻幾分鐘。
然后倒出水,然后添加蛋白質(zhì)溶液,添加的量不應(yīng)超過(guò)管頂部的白線,操作應(yīng)輕巧,在添加蛋白質(zhì)溶液之前,超濾離心管需要在冰上預(yù)先冷卻。
beckman超速離心管質(zhì)量和重心必須保持平衡,注意,速度和加速度不能太快,否則會(huì)直接損壞超濾膜,開始離心超濾。將離心機(jī)的加速度調(diào)整到較低水平,以降低膜上的壓力,請(qǐng)注意,在離開離心機(jī)之前,必須等待離心機(jī)達(dá)到目標(biāo)速度,否則,如果離心機(jī)出現(xiàn)問題,將沒有時(shí)間進(jìn)行處理,其后果將不可預(yù)測(cè)!